Deux pistes sonores sont présentes sur ce DVD, toutes deux au format Dolby Digital 5.1. Le doublage français est bien celui de l'Europe, avec des voix particulièrement bien choisies même si l'écoute du film en version originale anglaise est plus conseillée.

Globalement la bande sonore de la 25ème Heure n'est pas des plus mouvementées. C'est donc principalement sur les avants que le spectacle se déroule, même si les arrières bénéficient quelques fois de bruitages d'ambiances et relayent la superbe musique de Terence Blanchard. Toutefois, la donne change complètement lors de la longue scène dans la boîte de nuit : les enceintes sont alors toutes sollicitées, et le gros de la bande-son passe tout à coup dans les arrières pour des scratchs intempestifs illustrant le trouble du personnage de Philip Seymour Hoffman face à celui d'Anna Paquin. Impressionnante démonstration de spatialisation, ce passage à lui tout seul prouve à quel point ces pistes sonores ont été soignées.



Fait remarquable pour être signalée, la piste française bénéficie d'un mixage absolument identique à la piste anglaise, avec donc la même efficacité. Seules les voix sont légèrement plus mises en avant, mais cela reste insignifiant par rapport à ses homologues sur d'autres films.
On regrette toutefois un peu qu'il n'y ait pas de piste DTS sur cette édition, les ambiances auraient sans doute été plus soutenues...

Seuls des sous-titres anglais pour malentendants sont disponibles sur le film : jaunes (on aime ou pas), ceux-ci retranscrivent parfaitement les dialogues du film. Un bon niveau d'anglais est nécessaire pour en comprendre les subtilités (utilisation souvent de l'argot), même si dans l'ensemble cela reste tout à fait compréhensible pour qui dispose seulement de quelques bases.
Une piste de sous-titrage français est aussi inclus sur le DVD, mais elle ne sert qu'à l'écoute du film en français, ne sous-titrant que pancartes, écriteaux, etc...